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谈机制Rh阴性冰冻解冻去甘油红细胞游离血红蛋白超标1例

     采供血机构采集的R H 阴性血液, 根据G B 1 8 4 6 9 - 2 0 1 2《全血及成分血的质量要求》的规定,将采集后6 d 内的RH阴性全血或悬浮红细胞的红细胞分离出,将一定浓度和容量的甘油与其混合后速冻,储存于-65℃;在临床患者有需求时,根据需求对相应血型、血量的冰冻红细胞进行解冻、复温、去甘油和洗涤,清除几乎所有的甘油、游离Hb并用一定量的生理盐水悬浮红细胞后发往临床。在用全自动细胞洗涤机洗涤解冻红细胞的过程中,出现了1例游离Hb超标的情况,现报道如下。
  材料与方法
  1 血液来源
  献血者,男性,AB型,献血400 ml,献血码为14049428,复检合格,分装200 ml×2,200 ml发往临床,6 d后将未发出的200 ml血液按相应SOP制备成冰冻红细胞,置–80℃冰箱内保存,冰冻前的血辫游离Hb为0.39g/L,在正常范围内。
  2 试剂与仪器
  5 7 % 甘油( 批号1 4 0 9 1 1 2 ) 、9 % 浓盐水( 批号1 4 1 1 0 9 1 ) 、0 . 9 % 盐水( 批号1 4 1 0 2 5 2 ) 、A C P 2 1 5耗材236(批号D13050)、无菌接合机(日本泰尔茂)、全自动细胞洗涤机(美国血技)。
  3 解冻洗涤
  过程 从–80℃冰箱取出血液后,置40℃水浴箱溶化,待全部血液溶化后,取出和转移袋连接,称重并和洗涤耗材连接,进行安装、洗涤。洗涤结束时,机器报告游离Hb>150,(即>1.5 g/L)表明在此血液中游离Hb是超出国家标准的(GB:游离Hb<1 g/L),随即对该血液进行留样,并进行手工进一步洗涤,对再次洗涤后的血液留样,一并交质量管理科进行检测。
  结 果
  质量管理科检测结果:进一步洗涤前游离Hb为2.57g/L,远远超出国标,再次洗涤后游离Hb为0.68 g/L,符合国家标准,随即该血液发往临床。
  讨 论
  该血液从采集到发往临床, 经历了复杂的采集、储存、分离制备、冰冻、解冻洗脱的过程,任何一个环节操作不到位,都可能造成红细胞破损,从而引起大量游离血红蛋白的产生。特别是在冰冻解冻过程中,一是可能甘油加入的速度过快,短时间内细胞内外的渗透压压差大,导致红细胞破裂;二是可能一时疏忽加入甘油的量不足,或者在加入甘油后平衡时间不到半小时,冰冻时大量冰晶的产生造成对红细胞的破坏;三是水浴箱的温度达不到要求,血液溶化受到影响,导致红细胞破裂。如果在各环节造成大量的游离Hb出现,常规的去甘油和洗涤过程难以使血液产品达到国标要求,必须作进一步的处理。虽然在工作中这种现象并不多见,但它的发生也意味我们工作有疏忽和不严谨的环节,特别是在冰冻过程中几个容易发生溶血的环节应格外注意,应采取必要的措施,避免不合格现象的再次发生。